本品系用具有免疫調(diào)節(jié)及抑瘤等活性的厭氧棒狀桿菌經(jīng)培養(yǎng)后制成懸液，加甲醛殺菌，以無菌緩沖生理鹽水稀釋而成。用于惡性腫瘤及其他疾病的免疫治療。 1　菌種 1.1　菌種來源 制造菌苗用的菌種采用厭氧短棒狀桿菌H75010或其他經(jīng)試驗證明安全有效的菌株。生產(chǎn)用菌種和檢定用血清，由中國藥品生物制品檢定所分發(fā)或經(jīng)同意。 1.2　菌種檢定 1.2.1　培養(yǎng)特性 檢定菌種用碎肉半流體、肝硫乙醇酸鈉培養(yǎng)基或其他適宜培養(yǎng)基。本菌應為革蘭氏陽性短棒狀菌，有異染顆粒。 1.2.2　生化反應 應發(fā)酵葡萄糖，不發(fā)酵棉子糖、麥芽糖、蔗糖，液化明膠，靛基質、硝酸鹽反應陽性。 1.2.3　血清學試驗 應屬Ⅰ型。Ⅰ型血清由中國藥品生物制品檢定所供應或經(jīng)同意。 1.2.4　脾激活試驗 用體重18～20g純種小白鼠（C3H、615或C57BL），試驗及對照各10只，雌雄各半。試驗組每只腹腔注射菌液0.5ml（15億菌），對照組注射同量生理鹽水，14天處死小白鼠，分別稱體重、脾重、計算脾指數(shù)，其指數(shù)應不低于2.0。 脾指數(shù)=試驗組脾重（mg）/總體重（g）÷對照組總脾重（mg）/總體重（g） 1.2.5　抑瘤試驗（艾氏腹水癌） 用體重18～20g純種小白鼠（C3H、615、C57BL或K-LACA），試驗及對照組各10只。雌雄各半，每只腹腔注射活的瘤細胞100萬/0.2ml（用傳代5～8天非血性腹水）。試驗組于注射瘤細胞前1天及攻瘤后次日起，連續(xù)腹腔注射菌液0.25ml（15億）3～5次，每次間隔1天，對照組同時注射同量生理鹽水，由對照組小白鼠全部因癌性腹水死亡起點計算試驗組小白鼠存活率，觀察期最長30天，其存活率應不低于70%。 1.2.6　毒性試驗 小白鼠及分組要求同1.2.4項，稱總體重，試驗組每只小白鼠腹腔注射0.5ml菌液（15億），對照組注射同量生理鹽水，觀察1周，到期稱總體重，不得較試驗前減輕或死亡。 1.3　菌種保存 菌種應凍干，置2～8℃保存。 2　菌苗制造 2.1　制造用培養(yǎng)基 可用蛋白胨、肝或酵母透析液培養(yǎng)基或其他適宜培養(yǎng)基。 2.2　原液制造 2.2.1　接種 連續(xù)2～4次傳代的種子液接種于大瓶或培養(yǎng)罐，36～37℃厭氧培養(yǎng)4～6天。 2.2.2　采集 到期之培養(yǎng)物采集前逐瓶或逐罐鏡檢，有雜菌污染者廢棄。 2.2.3　殺菌 采集之菌體加入不超過0.5%(ml/ml)甲醛溶液，殺菌48小時后進行無菌試驗，不得有任何菌生長。 2.2.4　菌液洗滌 無菌試驗合格的菌液經(jīng)離心沉淀后，用新鮮無菌生理鹽水洗滌3次，其最后一次用無菌生理鹽水做成懸液，加溫60～65℃1小時，逐瓶做無菌試驗，合格后合并。 2.2.5　原液合并 無菌試驗合格的菌液合并成批，放2～8℃保存。 2.3　原液檢定 2.3.1　鏡檢 菌形正常，至少觀察10個視野，應無雜菌。 2.3.2　無菌試驗 按《生物制品無菌試驗規(guī)程》進行。 2.3.3　濃度測定 按中國細菌濁度標準測定。 2.3.4　毒性試驗 按1.2.6項進行。 2.3.5　脾激活試驗 除脾指數(shù)應不低于1.5個，余同1.2.4項。 2.3.6　抑瘤試驗 同1.2.5項。樣品應先按2.6項加溫處理。 2.4　菌液稀釋 2.4.1　稀釋 根據(jù)2.3.3項測定的原液濃度用無菌磷酸鹽緩沖液生理鹽水（pH7.2～7.4）稀釋成每ml含菌體60億±的菌苗。 2.4.2　分批 同一天由同一批原液稀釋的菌苗作為1批，如1批有數(shù)瓶，應分亞批。 2.4.3　檢定 稀釋的菌苗應逐瓶做無菌試驗。 2.5　分裝 經(jīng)2.4.3項檢定合格的菌苗在充分搖勻下分裝。 2.6　加熱處理 分裝安瓿后立即60℃±2℃加熱30分鐘。 3　成品檢定 3.1　理化檢定 菌苗應為乳白色懸液，pH6.6～7.2，無異味，無搖不散的菌塊及異物。 甲醛含量不得超過0.006%（ml/ml）。 3.2　無菌試驗 按《生物制品無菌試驗規(guī)程》進行。 3.3　脾激活試驗 按2.3.5項進行 3.4　抑瘤試驗 按1.2.5項進行（檢定合格的原液在半年內(nèi)分裝者，成品可不再作3.3～3.5項檢定）。 3.　5　濃度測定 按2.3.3項測定，每ml應含菌體60億±10%。 3.6　安全試驗 用18～20g白小鼠5只，每只皮下注射菌苗0.5ml，觀察7日，不得有局部膿腫或死亡。 4　保存與效期 應保存于2～8℃。自原液采集之日起效期為2年半。